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简述土壤有机物检测试剂盒的两种不同检测模式
更新时间:2022-07-26   点击次数:750次
   土壤有机物是指存在于土壤中的所含碳的有机物质,它包括各种动植物的残体、微生物体及其会分解和合成的各种有机质,是土壤固相部分的重要组成成分,其含量水平是衡量土壤肥力的重要指标之一,对土壤形成、土壤肥力、环境保护及农林业可持续发展等方面都有着重要作用的意义。
 
  今天要为大家介绍的是土壤有机物检测试剂盒的两种检测模式:
 
  双杂交探针模式:FRET探针又称双杂交探针,FRET探针由两条相邻探针组成,在一条探针端标记FAM荧光基团,另一探针端标记Red640荧光基团。当复性时,探针结合在模板上,FAM基团和Red640基团相邻,激发FAM产生的荧光,作为Red640基团的激发光被吸收,使Red640发出波长为640的荧光。当变性时,探针游离,两基团距离远,不能产生640波长的荧光。由于FRET探针是靠近发光,所以检测信号是实时信号,非累积信号。
 
  交探针模式:分子信标是一种呈发夹结构的茎环寡核苷酸探针,两端的核酸序列互补配对,因此标记在一端的荧光基团与标记在另一端的淬灭基团紧紧靠近。荧光基团被激发后产生的光子被淬灭剂淬灭,由荧光基团产生的能量以红外而不是可见光形式释放出来。分子信标的茎环结构中,环一般为15-30个核苷酸长,并与目标序列互补;茎一般5-7个核苷酸长,并相互配对形成茎的结构。荧光基团标记在探针的一端,而淬灭剂则标记在另一端。在复性温度下,因为模板不存在时形成茎环结构,当加热变性会互补配对的茎环双链解开,如果有模板存在环序列将与模板配对。与模板配对后,分子信标将成链状而非发夹状,使得荧光基团与淬灭剂分开。当荧光基团被激发时,因淬灭作用被解除,发出激发光子。由于是酶切作用的存在,分子信标也是积累荧光。

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