土壤有机物是指存在于土壤中的所含碳的有机物质，它包括各种动植物的残体、微生物体及其会分解和合成的各种有机质，是土壤固相部分的重要组成成分，其含量水平是衡量土壤肥力的重要指标之一，对土壤形成、土壤肥力、环境保护及农林业可持续发展等方面都有着重要作用的意义。

 

　　今天要为大家介绍的是土壤有机物检测试剂盒的两种检测模式：

 

　　双杂交探针模式：FRET探针又称双杂交探针，FRET探针由两条相邻探针组成，在一条探针端标记FAM荧光基团，另一探针端标记Red640荧光基团。当复性时，探针结合在模板上，FAM基团和Red640基团相邻，激发FAM产生的荧光，作为Red640基团的激发光被吸收，使Red640发出波长为640的荧光。当变性时，探针游离，两基团距离远，不能产生640波长的荧光。由于FRET探针是靠近发光，所以检测信号是实时信号，非累积信号。

 

　　交探针模式：分子信标是一种呈发夹结构的茎环寡核苷酸探针，两端的核酸序列互补配对，因此标记在一端的荧光基团与标记在另一端的淬灭基团紧紧靠近。荧光基团被激发后产生的光子被淬灭剂淬灭，由荧光基团产生的能量以红外而不是可见光形式释放出来。分子信标的茎环结构中，环一般为15-30个核苷酸长，并与目标序列互补；茎一般5-7个核苷酸长，并相互配对形成茎的结构。荧光基团标记在探针的一端，而淬灭剂则标记在另一端。在复性温度下，因为模板不存在时形成茎环结构，当加热变性会互补配对的茎环双链解开，如果有模板存在环序列将与模板配对。与模板配对后，分子信标将成链状而非发夹状，使得荧光基团与淬灭剂分开。当荧光基团被激发时，因淬灭作用被解除，发出激发光子。由于是酶切作用的存在，分子信标也是积累荧光。